La prueba de Coombs
¿Qué es una prueba de Coombs?
La prueba de Coombs se utiliza para detectar anticuerpos contra los glóbulos rojos (eritrocitos). Para la determinación de anticuerpos se utiliza el denominado suero de Coombs, que se obtiene del suero de conejos y se sensibiliza a los anticuerpos humanos.
La prueba se utiliza si se sospecha anemia hemolítica, incompatibilidad rhesus o poco antes de una transfusión de sangre. La anemia hemolítica es una forma de anemia y la incompatibilidad rhesus describe una incompatibilidad de grupo sanguíneo.
Hay dos tipos diferentes de prueba de Coombs, la prueba directa e indirecta difieren en términos de indicación y ejecución.
Las razones de una prueba de Coombs
La prueba de Coombs directa se utiliza si se sospecha anemia hemolítica. La anemia hemolítica describe la anemia en la que las células sanguíneas se descomponen prematuramente debido a un daño.
En enfermedades autoinmunes como el lupus eritematoso sistémico, la artritis reumatoide o la leucemia linfática crónica, se forman anticuerpos que se dirigen contra las propias células sanguíneas del organismo (los denominados eritrocitos). La unión de los anticuerpos conduce a la descomposición temprana de las células sanguíneas o al agrupamiento de las células sanguíneas en los vasos. Ambos conducen a una caída en el valor de hemoglobina.
Otra indicación para la prueba de Coombs directa es la enfermedad por haemolyticus neonatorum, aquí se forman anticuerpos contra el factor rhesus en el cuerpo de la madre rhesus negativa. Si el feto es positivo para rhesus, los anticuerpos de la madre pueden entrar en la circulación del feto e iniciar una mayor degradación de las células sanguíneas allí. Los recién nacidos se destacan con anemia e ictericia severas.
La prueba de Coombs se usa regularmente en medicina transfusional. Se utiliza para determinar los grupos sanguíneos antes de una transfusión de sangre (prueba de cabecera), en la que se mezcla una pequeña muestra de sangre con varios sueros de los grupos sanguíneos A, B, AB y 0. Si la sangre permanece fluida, la sangre del paciente es compatible con el grupo sanguíneo correspondiente. La transfusión se puede realizar.
La prueba de Coombs indirecta también se puede utilizar para buscar anticuerpos libres en el cuerpo del paciente (prueba de búsqueda de anticuerpos), p. durante los controles de maternidad, en preparación de una transfusión para pacientes oncológicas o personas que ya han recibido una transfusión de sangre.
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La preparación
En preparación para la prueba de Coombs, primero se preparan los sueros con los anticuerpos que se van a analizar. Se introducen en diferentes tubos de ensayo o se aplican a tarjetas de ensayo.
En la práctica clínica diaria, p. Ej. con la prueba de cabecera ya hay tarjetas de prueba preparadas que se pueden utilizar inmediatamente. A continuación, se extrae sangre del paciente y se prepara para la prueba. Dependiendo del tipo de prueba de Coombs que se realice, se necesitan las células sanguíneas o el suero (parte líquida de la sangre) del paciente.
La secuencia
Si se realiza una prueba de Coombs directa, los glóbulos rojos se filtran de la sangre del paciente. Se debe probar si hay anticuerpos del tipo IgG en ellos, que pueden causar anemia hemolítica o incompatibilidad de grupos sanguíneos en el cuerpo. El suero de Coombs contiene anticuerpos contra anticuerpos IgG humanos. La mezcla se calienta (incuba) durante mucho tiempo. Si hay anticuerpos en los glóbulos rojos, se agrupan y la prueba se vuelve positiva.
La prueba de Coombs indirecta consta de dos partes. El objetivo es determinar los anticuerpos que están libres en la sangre y no están unidos a las células sanguíneas.
Esta vez, la porción líquida (suero) se filtra de la sangre del paciente. Primero, se agregan glóbulos rojos al suero para la prueba. Si hay anticuerpos libres en el suero, se unirán a los glóbulos rojos. Esta reacción no es visible. Solo en el segundo paso, como en la prueba de Coombs directa, se agrega y se calienta el suero de Coombs con anticuerpos contra anticuerpos humanos. Aquí, también, la solución se aglutina si el resultado es positivo.
La evaluación
Si los anticuerpos se combinan con un suero de Cooms adecuado, los anticuerpos del suero (parte líquida de la sangre) se unen a los anticuerpos del paciente. Los anticuerpos tienen forma de Y, lo que significa que siempre pueden unirse a dos compañeros de unión y, por lo tanto, entrecruzar los glóbulos rojos entre sí. Se crea una gran acumulación de células sanguíneas. Estos grumos se vuelven visibles: la sangre se aglutina (grumos) y la prueba es positiva.
Si el paciente no tiene los anticuerpos adecuados, el suero permanece líquido. No puede ver ningún cambio, la prueba es negativa.
Cuales son las alternativas?
Una alternativa a la prueba de Coombs es el método ELISA inmunológico (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas), en el que ciertos anticuerpos se marcan con una enzima. Este anticuerpo se agrega a la solución de prueba. Si los anticuerpos marcados reaccionan con los anticuerpos en la solución de prueba, la enzima unida se activa y produce un tinte. Los tubos de ensayo correspondientes cambian de color: la prueba es positiva.
Además del procedimiento ELISA, también existe la transferencia WESTERN, que a menudo se utiliza como prueba de confirmación para un ELISA positivo.